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蛋白芯片和抗體芯片
更新時(shí)間:2011-04-06   點(diǎn)擊次數(shù):2057次

蛋白芯片和抗體芯片
zui后更新:2010-4-13 閱讀次數(shù):21 【字體:小 中 大】
蛋白芯片技術(shù)是根據(jù)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用規(guī)律而設(shè)計(jì)的高通量蛋白檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)。其主要特點(diǎn)是將已知蛋白陣列固定在支撐物表面,用來(lái)檢測(cè)相配對(duì)的未知蛋白,這種新技術(shù)使得研究人員可以在一次實(shí)驗(yàn)中比較生物樣品中成百上千的蛋白質(zhì)的相對(duì)豐度,相對(duì)于傳統(tǒng)技術(shù)而言,效率大為提高。固定在支撐物上的蛋白質(zhì)可以是抗體、抗原、受體、配體、酶、底物以及蛋白結(jié)合因子等。在實(shí)際應(yīng)用中,抗體芯片研究得zui多,其次是酵母雙雜交技術(shù)。后者是將表達(dá)不同蛋白的酵母單克隆分別固定,檢測(cè)能與相互作用的蛋白質(zhì)的細(xì)胞。
抗體芯片(Antibody Microarray),是將能識(shí)別特異抗原的抗體制成微陣列,檢測(cè)生物樣品中抗原蛋白表達(dá)模式的方法。這種抗體微陣列可以在一次簡(jiǎn)單實(shí)驗(yàn)中同時(shí)檢測(cè)樣品中的數(shù)百甚至數(shù)千種蛋白質(zhì)的表達(dá)情況,并且可以在一張芯片上對(duì)兩種樣品的表達(dá)模式進(jìn)行比較分析。這使得抗體芯片在毒性實(shí)驗(yàn)、疾病研究和藥物開(kāi)發(fā)上有廣泛的應(yīng)用前景。
抗體芯片的檢測(cè)操作并不要求特殊的技能,一般常規(guī)的操作就可以完成以往極為復(fù)雜耗時(shí)的工作。整個(gè)檢測(cè)操作流程包括:從組織或細(xì)胞、體液中提取蛋白質(zhì),并用Cy5和Cy3兩種不同顏色的熒光分子分別標(biāo)記被檢測(cè)樣品和對(duì)照樣品,去除多余的標(biāo)記分子后與芯片雜交孵育,zui后掃描分析結(jié)果。整個(gè)過(guò)程從樣品制備到結(jié)果分析只要一天即可完成。在抗體芯片制作方面,如何獲得高質(zhì)量的抗體,提高特異性、

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